液相色譜法在中藥分析中的應用
時間：2019-08-28作者：人氣：1103
一、真?zhèn)舞b別
對于中藥的鑒別目前使用的方法較多，每種方法都有其特點和操作方法，鑒別方法也有針對的中藥和范圍，在操作起來會顯得過程繁瑣。中藥指紋圖譜可以全面的反應中藥中化學成分和特征。而到中藥的真?zhèn)挝粗獣r可以通過中藥指紋圖譜進行鑒別和區(qū)分。
二、非法染色
非法染色是近年來曝光較多的中藥摻偽行為，染色中藥以次充好，不僅影響了中藥臨床療效，而且對患者健康帶來潛在危害。色素可分為天然色素和人工合成色素，部分合成色素具有致敏性和癌誘變性。因此中藥染色已嚴重影響中藥安全，需要加強監(jiān)管和執(zhí)法。
目前國家頒布的一系列藥品檢驗補充檢驗方法主要針對10 余種單味藥材采用薄層色譜法( TLC) 和高效液相法( HPLC) 檢測1 ～ 5種色素。繼國家相關檢驗標準公布后，中藥染色出現(xiàn)了新的變化，具有規(guī)避標準規(guī)定色素品種、多種色素配色染色等趨勢。
越來越多的研究者采用薄層、高效液相色譜、液相三重四級桿串聯(lián)質譜、UHPLC-QTOF 建立了中藥中多達數(shù)十種常見染色色素系列定性、定量檢測方法，依色素性質，分別采用溶劑提取、固相萃取等前處理方法，采用UPLC-QTOF等方法 進行測定。建立的方法覆蓋色素品種多，適用于多種中藥品種，具備高通量、準確等特點，為中藥染色檢測提供了急需的參考方法。
三、非法添加
糖皮質激素是由腎上腺皮質zui中層束狀帶分泌的一種代謝調節(jié)激素，具有調節(jié)糖、脂肪和蛋白質的生物合成和代謝的作用，臨床上應用于內(nèi)分泌代謝病、感染性疾病、血液病、心血管疾病、風濕免疫病、呼吸疾病等的治療。但不適當?shù)氖褂每蓪е露喾N不良反應，引起代謝紊亂。一些中藥制劑中非法添加糖皮質激素，使患者短期內(nèi)病情得到改善，但會對健康造成嚴重威脅。
目前，檢測藥品和保健品中糖皮質激素的方法主要有TLC 法、HPLC 法、LC-MS /MS 法、UPLC-MS /MS 法或幾種方法的聯(lián)用，檢測的添加劑種類都在20 種左右。
四、過程控制
隨著中藥在國際上的廣泛應用，其有效性、安全性和制藥工藝過程質量穩(wěn)定性等問題引起了專家學者的廣泛關注。中藥質量控制一直是中藥研究與生產(chǎn)的難點和熱點，也是實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的重要基礎和關鍵。中藥指紋圖譜是指中藥經(jīng)適當處理后，采用現(xiàn)代科學分析手段，得到的能夠標示該中藥化學特性的共有圖形( 圖像) 的圖譜。近年來，中藥指紋圖譜在中藥質量控制方面得到了廣泛應用，成為一種能為國內(nèi)外廣泛接受的中藥質量評價模式，符合中藥多數(shù)以復方和多成分給藥的特點，能較好地評價中藥及其制藥過程的真實性、穩(wěn)定性和一致性。
現(xiàn)有以單一的化學成分變化來控制中藥制藥的過程，難以體現(xiàn)中藥制藥過程中化學成分的整體變化，也很難保證中藥藥效物質基礎的穩(wěn)定傳遞。采用多指標成分含量測定和色譜指紋圖譜技術的控制模式，可對中藥制藥過程進行精確的全程控制，有效保證中藥的有效性和穩(wěn)定性，將成為中藥質控的重要手段，具有良好的應用前景。
五、質量控制
中藥質量標準的不完善是阻礙中藥產(chǎn)業(yè)走向現(xiàn)代化與國際化的障礙。中藥質量控制模式研究從zui初依靠簡單的外觀性狀觀察和顯微鑒別，到具有專屬性薄層定性鑒別和內(nèi)在成分的定量檢測方向發(fā)展。
研究者早期將薄層色譜引入中藥鑒定，因其具有快速、簡便等優(yōu)點而被廣泛使用。高效液相色譜(HPLC)、氣相色譜(GC)、質譜(MS)等方法及各種方法的聯(lián)用也被廣泛應用于中藥質量標準的研究。指紋圖譜與有效成分定量測定的結合、指紋圖譜與藥效關系的研究也推動了中藥質量標準研究的發(fā)展。在定量指標方面，由測定單一成分向測定多種成分發(fā)展。目前，劉昌孝院士提出了質量標志物的概念，為中藥質量控制的研究提出了新要求。液相色譜法在中藥的質量控制中已經(jīng)被廣泛使用，具有操作簡單、快速、高效、高靈敏度的特點，并且對于揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、相對分子質量大的高分子化合物以及離子型化合物尤為適合。
六、研究進展
1、在線二維液相色譜技術在中藥研究中的應用進展
中藥化學成分是中藥藥效的物質基礎，但往往一味中藥就囊括了從極性到非極性、從小分子到大分子的多種化合物，其組成極為復雜。因此，對中藥化學成分進行全面、快速地表征一直是中藥分析研究的熱點與難點，也是研究和闡明中藥藥效物質基礎的先決條件。在現(xiàn)代中藥研究中，色譜技術尤其是液相色譜(LC)作為zui常用的分離、分析手段扮演著不可替代的角色。多維液相色譜的建立和運用也為中藥物質基礎表征和活性成分篩選提供了新技術。
在線二維液相色譜因峰容量高、分離效率好而受到眾多研究者的青睞。近年來，在線二維液相色譜被廣泛地應用于多個研究領域中復雜樣品的分析。在線二維液相法在中藥中的應用顯著地提高了中藥化學成分分析和識別的效率，為后續(xù)藥效物質基礎、作用機制和質量評價研究奠定了良好基礎。
2、超高效液相色譜法在中藥分析中的應用
近年來，隨著超高效液相色譜 的興起，及其與指紋圖譜技術的迅速融合， 超高效液相色譜指紋圖譜技術在中藥質量評價中顯示出獨特的優(yōu)勢。有研究對比了土茯苓藥材的UHPLC和HPLC指紋圖譜， 發(fā)現(xiàn)UHPLC在10 min 內(nèi)完成的譜峰，HPLC需要75 min才能完成， 說明UPLC的分析效率更高，可顯著縮短分析時間，減少流動相的消耗;UHPLC可檢測更微量的樣品，進樣量為1∶20 時，色譜峰高基本一致， 說明UHPLC的色譜分離效果更好、靈敏度更高;UHPLC的洗脫條件比HPLC的變化更簡單，色譜峰的漂移時間較短，在指紋圖譜軟件中色譜峰易于匹配。相關質控技術已成功應用于復方丹參滴丸，并被2010 年版《中國藥典》收載。
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